ReproCryo DMSO Free RM
(マスターファイル登録申請準備中) NEW

製品分類 : ヒトES/iPSC-培養試薬研究テーマ : ES/iPS細胞

DMSO Free
製品概要

≪今までに無い!DMSO不含、緩慢凍結法のヒトiPS細胞凍結保存液≫

ReproCryo DMSO Free RMは、京都大学再生医科学研究所が発明したDMSO不含の凍害保護液を、
未分化ヒトES/iPS細胞の凍結保存に適用することで、製品化したものです。

※特許申請中


≪特徴≫

 ・ヒトES/iPS細胞の緩慢凍結法に用います。
 ・動物由来成分を含まずに既知の成分で構成されています。
  (Xeno free, Chemically defined)
 ・DMSOフリーで、今後のGMPグレード製品化により、再生医療に適用可能になります。
 ・凍結融解後の立ち上がりが良く、生存率も良好です。

◎本製品は京都大学との共同プロジェクトにて開発されました


※保存温度:-20℃以下

製品リスト・価格

品番 製品名 希望小売価格(税抜)
RCHEFM003 ReproCryo DMSO Free RM(50 mL) ¥15,000

関連製品

≪オンフィーダー培養用試薬≫

製品名・概要
Primate ES Cell Medium
京都大学iPS細胞研究所 (CiRA) の山中伸弥教授が発表された、ヒトiPS細胞樹立、培養に関する論文 (Cell 131, 1-12(2007)) でも利用された、リプロセルブランドのヒトiPS細胞、ヒトES細胞の培養に最適な培地です。
ReproStem
霊長類ES/iPS細胞用培地 (Primate ES Cell Medium) を基に開発した低価格なオンフィーダー培養用培地です。
MEF(3x106 cell)
マウス胎児由来線維芽細胞(Mouse embryonic fibroblast)。マウス、サル、ヒトES細胞、ヒトiPS細胞のフィーダー細胞として幅広くお使いいただけます。
SL10(3x106 cell)
京都大学iPS細胞研究所(CiRA)の山中伸弥教授がiPS細胞樹立時にご使用になったSNL細胞と同じSTO細胞株由来のフィーダー細胞です。マウス、サル、ヒトES/iPS細胞のフィーダー細胞として幅広くお使いいただけます。
ReproCoat
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞のオンフィーダ培養に最適なDishコーティング剤です。Ready to Useなので調製の手間が省けます。

≪フィーダーレス培養用試薬≫

製品名・概要
StemFitR AK02N
高性能・世界最高水準のヒトiPS細胞用フィーダーレス培地。味の素株式会社と京都大学iPS細胞研究所で共同開発した再生医療の臨床研究用の培地です。
NutriStem™ XF/FF
Xeno-freeな、ヒトES/iPS細胞用未分化維持培地
ReproFF2
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞用のフィーダーレス培養用培地です。培養作業は月・水・金のみですみ、培地使用量が約半分になります。
ReproXF
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞用のXeno-Free (ゼノフリー) 培地。コーティング剤、剥離液とともに、動物由来成分のない完全なXeno-Free培養システムが実現できます。
ReproFF
オンフィーダー培養と同じ感覚で、簡単にフィーダレス培養が可能。ロット単位のまとめ買いに最適な大変お得な5本セット (25%OFF) もございます。
Laminin-5
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞用Xeno-Freeコーティング剤。ヒトES細胞、ヒトiPS細胞のフィーダーレス培養に最適です。

≪グロースファクター≫

製品名・概要
bFGF
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞の培養に最適なHuman Recombinant bFGF(FGF-2:Basic fibroblast growth factor)です。
bFGF Xeno-Free(FGF-2)
完全なXeno-Free培養が可能なbFGF。従来品と同様の活性配列で、同様にヒトiPS細胞の未分化維持にて品質確認済みです。

≪細胞剥離液・凍結保存液≫

製品名・概要
CryoStem™
高い生存率を維持できるヒトES/iPS細胞用凍結保存液です。
CRYO-GOLD™
Chemically defined な組織・細胞用 緩慢凍結法 保存液。ヒトiPS/ES細胞をはじめ、多様な細胞の緩慢凍結に対応可能です。
Dissociation solution for human ES/iPS cells
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞剥離液 (CTK溶液)です。剥離液を加えピペッティング操作するだけで継代に適した大きさのコロニーに分割できるため、カッター等でコロニーを裁断して傷つけることはありません。
Freezing medium for human ES/iPS cells
ヒトES細胞、ヒトiPS細胞凍結保存液 (DAP213)です。一般的な保存液と比較して著しく高い生存率で凍結保存が可能です (解凍後3~4日後には継代が可能)。

≪未分化マーカー抗体≫

製品名・概要
Anti mouse Nanog antibody
京都大学中辻教授、多田准教授により開発された抗マウスNanog抗体(ラビット)です。マウスES細胞、iPS細胞の未分化マーカーとしてご使用いただけます。
Anti human Nanog antibody
京都大学中辻教授、多田准教授により開発された抗ヒトNanog抗体(ラビット)です。ヒトES細胞、ヒトiPS細胞の未分化マーカーとしてご使用いただけます。

≪その他 関連試薬≫

製品名・概要
hES Cell Cloning & Recovery Supplement
ES/iPS細胞の生存率を上げることができるサプリメントです。シングルES細胞で30倍以上の生存率向上の実績があります。

1. 解凍後の生存率

ReproCryo DMSO Free™はDMSO含有の他社品と同等の生存率を示しました。

■実験結果:生存率=解凍後の生細胞/解凍後の総細胞数 平均値+SD(n=3)
■細胞株:ヒトiPS細胞株201B7
■培養条件:・ReproXF(フィーダーフリー培養)・Vitronectinコーティング
■凍結条件:緩慢法(-80℃冷凍庫にBICELLで3時間、その後液体窒素、凍結解凍方法は各メーカー推奨のプロトコルに準拠)

 

2. 解凍後の増殖性

解凍後の初期の増殖性について3日間培養した結果、DMSO含有他社品と比較して、
増殖性も遜色ないことが確認されました。

■実験結果:平均値+SD(n=3)
■細胞株:ヒトiPS細胞株201B7
■培養条件:・ReproXF(フィーダーフリー培養)・Vitronectinコーティング
■凍結条件:緩慢法(-80℃冷凍庫にBICELLで3時間、その後液体窒素、凍結解凍方法は各メーカー推奨のプロトコルに準拠)

 

3. 解凍後の未分化性
【マーカー染色】

解凍後のiPS細胞の未分化性が維持されていることを、未分化マーカー染色により確認できました。

■実験条件:免疫染色
・ES cell Characterization kit (Millipore, Cat SCR001) ・Nanog:Reprocell RCAB0004PF ・Alexa
・Flour 488 Anti-mouse IgG (Invitrogen A11029) ・Alexa Flour 488 Anti-mouse IgM (Invitrogen A21442)
・スケールバー:100 μm
■細胞株:ヒトiPS細胞株201B7
■培養条件:・ReproXF(フィーダーフリー培養)・Vitronectinコーティング
■凍結条件:緩慢法(-80℃冷凍庫にBICELLで3時間、その後液体窒素)

 

【FACS 解析】

解凍後のiPS細胞の未分化性が維持されていることを、未分化マーカー染色細胞の
FACS(fluorescence activated cell sorting)解析によりさらに確認することができました。

■実験条件:
・FACS解析Human Pluripotent Stem Cell Sorting And Analysis Kit (BD560461)
・Human Pluripotent Stem ・Cell Transcription Factor (BD560589)
・BD Stemflow? Human Pluripotent Stem Cell Analysis and Sorting Kit (BD562626)
■細胞株:ヒトiPS細胞株201B7
■培養条件:・ReproXF(フィーダーフリー培養)・Vitronectinコーティング
■凍結条件:緩慢法(-80℃冷凍庫にBICELLで3時間、その後液体窒素)

データシート